A spektrofotometriás elemzés eltöltése: 13 lépés

Spectrophotometry - olyan kísérleti módszer, amely lehetővé teszi az oldott anyagok koncentrációjának mérését az elnyelt fény mennyiségével. Ennek a módszernek a nagy hatékonysága annak a ténynek köszönhető, hogy a különböző vegyületek eltérő módon abszorbeálódnak egy bizonyos hullámhosszúsággal. A fény áthaladásának mennyiségében kiderülhet, hogy mely vegyületek vannak jelen az oldatban, és meghatározzák koncentrációjukat. A laboratóriumokban speciális eszközt használnak erre - spektrofotométerre.

Lépések

3. rész:

Minták előkészítése

egy. Kapcsolja be a spektrofotométert. A legtöbb spektrofotométereknek előzetes fűtésre van szükség - segít pontosabb eredmény elérésében. Kapcsolja be a készüléket, és várjon legalább 15 percet a mérések folytatásához.

Használja a felmelegedési időt a minták előkészítéséhez.

A kép címe do spektrofotometriás analízis 2. lépés

2. Mossa meg a küvettákat és a kémcsöveket. Amikor laboratóriumi munkát végez az iskolában, megadhat egy eldobható kémcsöveket, amelyeket nem kell tisztítani. Ha újrafelhasználható küvettákat vagy kémcsöveket használ, a munka előtt meg kell öblíteni őket. Alaposan mossa meg az összes edényt ionmentes vízzel.

Vigyázzon, amikor meglehetősen drága lehet.

Ne érintse meg a kezét a küvetta falán lévő helyekre, amelyeken keresztül a fény átmegy (általában átlátszó oldalak).

A kép címe do spektrofotometriás elemzés 3. lépés

3. Töltse ki a küvetta a szükséges mennyiségű folyadékot a vizsgálat alatt. A maximális térfogata néhány küvetta 1 milliliter (ml), míg a vizsgálati csöveket 5 millilitával lehet kiszámítani. A pontos eredmények eléréséhez szükséges, hogy a lézersugár áthaladjon a folyadékon, és ne sértse meg a tartály üres részét.

Ha a folyadékot pipettával transzfixálja át, használjon új pipettát minden egyes oldathoz, hogy elkerülje a minták keresztszennyeződését.

A kép címe do spektrofotometriás elemzés 4. lépés

4. Készítsen szabályozási megoldást. A vezérlés, vagy az üresjárati oldat tiszta oldószer, szennyeződések nélkül más mintákban. Például, ha a sót vízben oldja, azt egyetlen megoldásként kell elhelyezni. Ha piros színű víz van, akkor is szükség van vörös vizet az üresjáratban. A tétlen megoldásnak azonos mennyiségűnek kell lennie, mint a vizsgált oldatok, és ugyanabba a tartályba kell öntenie.

A kép címe do spektrofotometriás analízis 5. lépés

öt. Törölje le a küvetta kültéri felületét. Mielőtt egy küvettát spektrofotométerbe helyeznénk, meg kell győződni arról, hogy tiszta, különben a szennyeződések és a por részecskéi torzíthatják az eredményeket. Törölje le a szöszmentes ruhát egy küvettal, hogy eltávolítsa a lehetséges vízcseppeket és a porrészecskéket.

3. rész: 3:

Kísérlet

egy. Válassza ki és állítsa be a fény hullámhosszát a minták elemzéséhez. Nagyobb pontosság érdekében használja a fényt egy hullámhosszúsággal (monokromatikus fény). Olyan hullámhosszúságot kell választani, hogy a fény az egyik vegyületet abszorbeálja, amely a vizsgálat alatt álló oldat részét képezi. Küldje el a kiválasztott hullámhosszt a spektrofotométeren a műszer működésének utasításai szerint.

Laboratóriumi osztályokkal a fény hullámhossza kérdezhet egy tanárt.
Mivel a minta tükrözi az összes fényhossz összes fényét, amely megfelel az oldat színének, a kísérletnek fényt kell használnia a másik hullámhosszon.
Az objektumok egy vagy másik színt tartalmaznak annak a ténynek köszönhetően, hogy tükrözik a megfelelő hullámhosszúságot, és elnyelik a sugárzást más hullámhosszúsággal. Grass Green annak a ténynek köszönhetően, hogy klorofillot tartalmaz, amely tükrözi a zöld fényt, és elnyeli a fényt más hullámhosszakkal.

A kép címe do spektrofotometriás elemzés 7. lépés

2. Kalibrálja a készüléket készenléti úton. Helyezze a spektrofotométer tartójába küvetta üresjáratsal és zárja be a készülék fedelét. Az analóg spektrofotométerek nyíl-skálával vannak felszerelve, amelynek eltérése az utolsó fény intenzitása határozza meg. Készenléti állapot esetén a nyíl elutasítja a jobb oldalt. Írja le a műszer-leolvasásokat, ha később szükségük van rá. Ezután mozgassa a nyíl a nulla helyzetbe a beállítógomb segítségével (míg az üresjárati megoldásnak továbbra is a készülékben kell maradnia).

A skála helyett digitális spektrofotométereket jelenítenek meg, és ugyanúgy kalibrálhatók. Állítsa be a nullát a beállítási gombokkal való üresjárathoz.

A kalibrálás folytatódik, miután megkapja az üresjárati megoldást. A minták többi részével való munkavégzés során a nem távoli oldószer által felszívódó fény automatikusan levonódik a műszer-leolvasásokból.

A képen címet spektrofotometriás elemzés 8. lépés

3. Szerezzen be egy nyugvót, és ellenőrizze a kalibrálást. Az üresjárat hiányában a nyílnak a nulla jelzésen kell maradnia (a nullát meg kell őrizni a kijelzőn). Reggle, hogy megoldást tegyen a készülékben, és győződjön meg róla, hogy a spektrofotométer még nulla látható. A megfelelő kalibrálással a készüléknek nullát és tétlen megoldást kell mutatnia, anélkül, hogy anélkül.

Nem nulla műszerleolványok esetén ismételje meg a kalibrálást egyetlen megoldással.

További problémák esetén kérjen segítséget, vagy olvassa el a szervizeszközt műszaki személyzet által.

A kép címe do spektrofotometriás analízis 9. lépés

4. Mérje meg a kísérleti minta optikai sűrűségét. Menj ki az eszköz üresjárati megoldásához, és helyezze a mintát. Várjon kb. 10 percig, amíg a nyíl megnyugtatja le, vagy amíg a számok nem fognak leállítani a változást. Ezt követően írja le az átviteli és / vagy optikai sűrűség értékét.

Minél több fény halad át a mintán, annál kevesebb a fény, amit elnyeli. Jellemzően olyan optikai sűrűségértékek rögzítése, amelyek a decimális frakció egyik formáját tartalmazzák, például 0,43.

Ismételje meg a méréseket az egyes mintákhoz legalább háromszor, és keresse meg az átlagos értékeket. Tehát pontosabb eredményeket kapsz.

A képen címe do spektrofotometriás analízis 10. lépés

öt. Ismételje meg a kísérletet más hullámhosszakra. A minta több olyan ismeretlen szennyeződést tartalmazhat, amely elnyeli a fényt különböző hullámhosszúsággal. A bizonytalanság kiküszöbölése érdekében ismételje meg a mérést 25 nanométeres teljes spektrumban. Ez lehetővé teszi, hogy más olyan vegyületeket határozzon meg, amelyek az oldat vizsgáltak.

3. rész: 3:

A kapott adatok elemzése

egy. Számítsa ki az átviteli együtthatót és az optikai minta sűrűségét. A sávszélesség megmutatja, hogy a fényen áthaladó fény aránya hogyan érte el a spektrofotométer-detektort. Az optikai sűrűség azt mutatja, hogy mennyi fény abszorbeált a folyadékban feloldott vegyületek egyike. Sok modern spektrofotométer azonnal megadja az átviteli és az optikai sűrűség arányát, de ha rögzítette az intenzitás értékeit, akkor kiszámíthatja ezeket az értékeket.

Az átviteli együtthatót (t) a fény intenzitásának megosztásával a fénymintán keresztül a fény intenzitására, amely az üresjárati oldaton áthaladt. Általában ez az együttható tizedes frakció vagy százalék formájában van írva. T = i / i₀, ahol az én a vizsgált mintán áthaladó fény intenzitása, én₀ - az üresjárati oldaton áthaladó fény intenzitása.
Az optikai sűrűség (A) megegyezik a 10 logaritmussal a negatív jelzéssel ellátott átviteli együtthatóból származó 10 logaritmussal: a = -log₁₀T. Ha t értéke 0,1, akkor az A jelentése 1 (0,1 egyenlő 10-re -1), vagyis a fény áthaladása 10% -a, és 90 százalék felszívódik. A T = 0,01 esetében az optikai sűrűség A 2 (0,01 10 és -2 fokozat), azaz csak 1 százalékos fény áthalad.

A kép do spektrofotometriás analízis 12. lépés

2. Építsd meg az optikai sűrűség függőségét a hullámhosszból. Tegye félre az optikai sűrűségét az OY függőleges tengelyére, és az ökör vízszintes tengelyére, jelölje meg a használt hullámhosszakat. Az egyes használt hullámhosszú optikai sűrűségcsúcsok a minta abszorpciós spektruma, amely meghatározható, hogy mely anyagok és milyen arányokban oldódnak meg ebben a mintában.

Az abszorpciós spektrum általában maximális hullámhosszúsággal rendelkezik, amely szerint meghatározhatja a kapott anyagot.

A kép do spektrofotometriás analízis 13. lépés

3. Hasonlítsa össze a kapott abszorpciós spektrumot ismert abszorpciós spektrumokkal különböző anyagokhoz. Mindegyik vegyületnek jellegzetes abszorpciós spektruma van, mindig ugyanabban a hullámhosszon csúcsot ad. Hasonlítsa össze a különböző anyagok ismert spektrumával ismeretlen megoldás spektrumát, és meghatározza, hogy mely kapcsolatok szerepelnek az oldatban.

Ezzel a módszerrel azonosíthatja a minta szennyeződését is. Ha elvárja, hogy egy bizonyos hullámhosszon egy külön csúcsot kapjon, és helyette két külön csúcsot észlel, azt jelenti, hogy valami baj van a mintával.

Amire szükséged van

Spektrofotométer
Megoldás kutatásra
Tiszta oldószer (kontroll oldathoz)
A vizsgált és kontroll megoldások kapacitása (küvetta, kémcsövek és hasonlók)